M-MLV Neoscript Reverse Transcriptase

Neoscript Reverse Transcriptase hè una trascrittasi inversa ottenuta da u screening di mutazione di u gene M-MLV di l'origine è l'espressione di u virus Moloney di leucemia murina in E.coli.L'enzima elimina l'attività RNase H, hà una toleranza di temperatura più altu, è hè adattatu per a trascrizzione inversa à alta temperatura.Per quessa, hè utile per eliminà l'effetti sfavorevoli di a struttura d'altu livellu di l'RNA è di i fatturi non specifichi nantu à a sintesi di cDNA, è hà una stabilità più alta è una capacità di sintesi di trascrizione inversa.L'enzima hà più stabilità è capacità di sintesi di trascrizione inversa.

Cumpunenti

1.200 U/μL Neoscript Reverse Transcriptase

2.5 × First-Strand Buffer (opzionale)

* 5 × First-Strand Buffer ùn cuntene dNTP, per piacè aghjunghje dNTPs quandu preparanu u sistema di reazione

Applicazione cunsigliata

1.qRT-PCR in un passu.

2.Rilevazione di virus RNA.

Cundizione di almacenamiento

-20 ° C per u almacenamentu à longu andà, deve esse mischju bè prima di l'usu, evitendu friquenti-discongeli.

Definizione di unità

Una unità incorpora 1 nmol di dTTP in 10 minuti à 37 ° C cù poly(A)•oligo(dT)₂₅cum'è mudellu/primer.

Controlu di qualità

1.Purezza elettroforetica SDS-PAGE più grande di 98%.

2.Sensibilità di amplificazione, cuntrollu batch-to-batch, stabilità.

3.Nisuna attività di nucleasi esogena, nè contaminazione di endonucleasi esogene o esonucleasi

Configurazione di reazione per a prima soluzione di reazione in catena

1.Preparazione di a mistura di reazzione

Note:a/b: Per piacè selezziunate diversi tipi di primers secondu e vostre esigenze sperimentali.

2.Calà à 65 ° C per 5 minuti è rinfriscà rapidamente nantu à u ghjacciu per 2 minuti.

3.Aghjunghjite i seguenti cumpunenti à u sistema sopra à un voluminu tutale di 20 µL è mischjà delicatamente:

4.Please eseguite a reazione secondu e seguenti cundizioni:

(1) Se Random Primer hè adupratu, a reazione deve esse realizata à 25 ℃ per 10 minuti, è dopu à 50 ℃ per 30 ~ 60 minuti;

(2) Se Oligo dT o primers specifichi sò usati, a reazione deve esse realizata à 50 ℃ per 30 ~ 60 minuti.

5.Riscalda à 95 ℃ per 5 minuti per inattivà Neoscript Reverse Transcriptase è finisce a reazione.

6.I prudutti di trascrizione inversa ponu esse aduprati direttamente in a reazione PCR è in a reazione PCR quantitativa di fluorescenza, o conservati à -20 ℃ per un bellu pezzu.

PCR Razzione:

1.Preparazione di a mistura di reazzione

Note:a: Sì troppu suluzione di prima reazzione in catena hè aghjuntu, a reazzione PCR pò esse impeditu.

2.Prucedura di Reazione PCR

Notes

1.Adatta per l'ottimisazione di a temperatura di trascrizione inversa in a gamma di 42 ℃ ~ 55 ℃.

2.Hè megliu stabilità, hè adattatu per l'amplificazione di trascrizione inversa à alta temperatura.Inoltre, hè favurevule per passà in modu efficiente attraversu regioni strutturali cumplessi di RNA.Inoltre, hèhè adattatu per a rilevazione quantitativa RT-PCR di fluorescenza multiplex in un passu.

3.Bona cumpatibilità cù diversi enzimi di amplificazione PCR è hè adattatu per reazioni RT-PCR d'alta sensibilità.

4.Adatta per a reazione RT-PCR quantitativa di fluorescenza in un passu di alta sensibilità, migliurà efficacemente a rata di rilevazione di bassa cuncentrazione di mudelli.

5.Adatta per a custruzzione di biblioteca di cDNA.