Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Descrizzione
Cat No: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix hè un kit di PCR quantitativa multiplex basatu in RNA cum'è mudellu.In l'esperimentu, a trascrizione inversa è a PCR quantitativa sò realizati in u stessu tubu di reazione, simplificà l'operazione sperimentale è riducendu u risicu di contaminazione.U disignu unicu di buffer è mix di enzimi pò esse usatu in un sistema liofilizatu in un passu.U kit utilizza a transcriptasi inversa resistente à u calore per a sintesi efficace di u primu filu di cDNA utilizendu hotstart Taq DNA Polymerase per l'amplificazione quantitativa.Contene buffer di reazione ottimisatu, mistura di enzimi, ecc., è fattori chì inibiscenu efficacemente l'amplificazione PCR non specifica è aumentanu l'efficienza di amplificazione di più reazioni qPCR sò stati aghjunti, chì permettenu l'amplificazione quantitativa di fluorescenza multipla assicurendu l'efficienza di amplificazione di i primers.
Cumpunenti
| Nome |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Enzyme Mix |
| 3. Lyo protecteur |
Cundizioni di trasportuion
A: Lyo-buffer è protettivu: -25 ~ -15 ℃, a durata di conservazione hè di 1 annu.
B: Mix di lyo-enzyme, 2-8 ℃, a durata di conservazione hè di 6 mesi.
Istruzzioni per u funziunamentu
1. Sistema di Reazione (Pigliate 25μL cum'è esempiu)
| Cumpunenti | Volume (μL) | Concentrazione finale |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Mix di lyo-enzimi | 1 | - |
| Lyo-Protettore | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Mélange de sondes (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
| Template RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Finu à 25 | - |
2. Protokollu Optimized Cycling
1) Protocolu Standard di Ciclismo
| Fase di reazione | Temperature | U tempu | Ciclu | |
| 1 | Trascrizione inversa | 50 ° Ca | 10 minuti | 1 |
| 2 | Denaturazione iniziale | 95 ° C | 5 min | 1 |
| 3 | Reazione di amplificazione | 95 ° C | 15 sec | 45 cicli |
| 60 ° Cb | 30 secc |
2) Protokollu di Ciclismo Veloce
|
| Fase di reazione | Temperature | U tempu | Ciclu |
| 1 | Trascrizione inversa | 50 ° Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Denaturazione iniziale | 95 ° C | 2 sec | 1 |
| 3 | Reazione di amplificazione | 95 ° C | 1 sec |
45 cicli |
| 60 ° Cb | 13 secc |
Nota:
a) Inversu trascrizzione: A temperatura pò selezziunà 42 ° C o 50 ° C per 10-15 minuti.
b) Reazione di amplificazione: La température est réglée selon la valeur Tm des primers conçus.
c)Fluorescenza signale acquistu: Per piacè stabilisce a prucedura sperimentale secondu i requisiti di umanuale di strumenti.
Informazioni tecniche / Specificazioni
| Hot Start | Partenza calda integrata |
| Metudu di rilevazione | Rilevazione di prima sonda |
| Metudu PCR | Un passu RT-qPCR |
| Tipu di mostra | RNA |
Notes
1. Stu pruduttu hè solu per usu di ricerca.
2. Per piacè purtassi u PPE necessariu, cum'è un mantellu di laboratoriu è guanti, per assicurà a vostra salute è sicurità!
