fosfatasi alcalina (ALP)
Descrizzione
A fosfatasi alkalina hè derivata da una ceppa di E. coli recombinante chì porta u genu TAB5.L'enzima catalizza a defosforilazione di l'estremità 5' è 3' di DNA è RNA fosfomonoesteri.Inoltre, idrolizza a ribosa, è ancu i desossiribonucleosidi trifosfati (NTPs è dNTPs).TAB5 Fosfatasi Alcalina agisce su estremità sporgenti da 5', incassate da 5' e smussate.A Fosfatasi pò esse aduprata in parechje applicazioni di biologia moleculare, cum'è a clonazione o l'etichettatura di l'estremità di a sonda per sguassà l'estremità fosforilate di DNA o RNA.In esperimenti di clonazione, a defosforilazione impedisce l'autoligatura di l'ADN plasmidiu linearizatu.Puderà ancu degradate dNTPs non incorporati in reazioni PCR per preparà un mudellu per a sequenza di DNA.L'enzima hè completamente è irreversibilmente inattivata da u riscaldamentu à 70 ° C per 5 minuti, rendendu cusì inutile a rimozione di a fosfatasi prima di a ligazione o l'etichettatura finale.
Usu
1.Alkaline phosphatase accoppiata à prutiìni (antibodies, streptavidin etc,) pò identificà specificamente molécules di mira, è pò esse usata in ELISA, WB è detezzione histochemical;
2.A fosfatasi alkaline pò esse usata per dephosphorize u 5 '-terminale di DNA o RNA per prevene l'auto-linking;
3. L'ADN o RNA defosforilatu sopra pò esse marcatu da fosfati radio-marcati (via T4 poly-nucleotide kinase)
Struttura chimica
Specificazione
| Elementi di prova | Specificazioni |
| Attività Enzyme | 5U/μL |
| Attività Endonuclease | Ùn hè micca rilevatu |
| Attività Exonuclease | Ùn hè micca rilevatu |
| Attività di Nicking | Ùn hè micca rilevatu |
| Attività RNase | Ùn hè micca rilevatu |
| DNA di E.coli | ≤1copia/5U |
| Endotossina | Test LAL, ≤10EU/mg |
| Purità | ≥95% |
Trasportu è almacenamentu
Trasportu:Ambiente
Conservazione:A conserver à 2-8°C
Re-test cunsigliatuA vita:2 anni
