Bst 2.0 DNA Polymerase (senza glicerina, alta densità)
Bst DNA polimerasi V2 hè derivata da Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, chì hà attività di DNA polimerasi 5′→3′ è una forte attività di sostituzione di a catena, ma senza attività di esonucleasi 5′→3′.Bst DNA Polymerase V2 hè idealmente adattatu per strand-splacement, amplificazione isotermica LAMP (Loop mediated isothermal amplification) è sequencing rapidu.Questa Bst DNA polymerase V2 hè capaci di inibisce l'attività di DNA polymerase à a temperatura di l'ambienti, perchè pò esse operatu è u sistema di reazione pò esse formulatu à a temperatura di l'ambienti, impediscendu l'amplificazione non specifica è migliurà l'efficienza di a reazione, è sta versione pò esse esse liofilizatu.Inoltre, hè capaci di liberà a so attività à temperature elevate, eliminendu cusì a necessità di un passu di attivazione separatu.
Cumpunenti
| Cumpunente | HC 5007A-01 | HC 5007A-02 | HC 5007A-03 |
| Bst DNA polimerasi V2 (senza glycerol) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 3 × 10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 2 × 10 ml |
Applicazioni
1.Amplificazione isotermica LAMP
2.Reazione di spostamentu di un filu di DNA
3.Sequenza di geni GC altu
4.Sequenza di DNA di livellu di nanogramma.
Cundizione di almacenamiento
U trasportu sottu 0 ° C è esse guardatu à -25 ° C ~ -15 ° C.
Definizione di unità
Una unità hè definita cum'è a quantità di enzima chì incorpora 25 nmol di dNTP in materiale insoluble à l'acidu in 30 minuti à 65 ° C.
LAMP Reazione
| Cumpunenti | 25 μLSistema |
| 10×HC Bst V2 Buffer | 2,5 μl |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μl |
| dNTP (10 mM ognunu) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Verde (25×)a | 1,0 μL |
| Primer mixb | 6 μl |
| Bst DNA Polymerase V2 (senza glicerolo) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Template | × μL |
| ddH₂O | Finu à 25 μL |
Note:
1) a.SYTOTM 16 Green (25×): Sicondu i bisogni sperimentali, altri tinti ponu esse aduprati cum'è sustituti;
2) b.Primer mix : obtenu en mélangeant 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB et autres volumes.
Reazione è cundizione
1 × HC Bst V2 Buffer, a temperatura di incubazione hè trà 60 ° C è 65 ° C.
Inattivazione di u calore
80 °C, 20 minuti.
