DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
Cat No: HC4007B
A DNase I hè una endonucleasi chì pò digerirà DNA a catena unica o doppia.Puderà idrolizà ligami fosfodiesteri per pruduce mono- è oligodeossinucleotidi chì cuntenenu un gruppu 5'-fosfatu è un gruppu 3'-OH.L'ottima gamma di pH di travagliu di DNase I hè 7-8.L'attività di DNase I dipende da Ca2+è pò esse attivatu da ioni di metalli divalenti cum'è CO2, Mn2+, Zn2+, etc In presenza di Mg2+, DNase I pò chjappà aleatoriamente ogni situ di DNA à doppia catena;Mentre in presenza di Mn2+, A DNase I pò cleave DNA double-stranded in u stessu situ, furmendu estremità blunt o sticky ends with 1-2 nucleotides protruding.Pò esse usatu per u processu di diversi campioni di RNA.
Cumpunenti
Nome | 1KU | 5KU |
DNaseI ricombinante (senza RNasi) | 500 μl | 5 × 500 μL |
Tampon di reazione DNase I (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Cundizioni di almacenamiento
Stu pruduttu deve esse guardatu à -25 ~ -15 ℃ per 2 anni.Per piacè evità u congelamentu-scongelu ripetutu.
Istruzzioni
Applicatu à a rimuzione di DNA da campioni di RNA per riferimentu solu.
1. Aduprate tubi da centrifuga senza RNasi è punte di pipette per preparà u sistema di reazione seguente:
Cumpunenti | Volume (μL) |
Tampon di reazione DNase I (10×) | 1 |
DNasel recombinante (senza RNasi) | 1 |
RNA | X |
DdH senza RNasi2O | Finu à 10 |
2. I cundizioni di riazzioni sò i seguenti: 37 ℃, dopu à 15-30 mins, aghjunghje una cuncintrazzioni finali di suluzione 2.5 mM EDTA è mischjà bè, poi 65 ℃ per 10 mins.U mudellu trattatu pò esse usatu per esperimenti successivi RT-PCR o RT-qPCR, etc.
Notes
1. DNase l hè sensittivi à a denaturazione fisica;Quandu mischjà, invertite delicatamente u provettu èscuzzulate bè, ùn scuzzulate micca vigorosamente.
2. L'enzima deve esse guardatu in una scatula di ghiaccio o in un bagnu di ghiaccio quandu s'utilice, è deve esse guardatu à -20 ℃ immediatamente dopu l'usu.
3. Stu pruduttu hè solu per usu di ricerca.
4. Per piacè operate cù mantelli di labburatoriu è guanti dispunibuli, per a vostra sicurità.