Sensibili à a temperatura UNG

Temperature Sensitive UNG (TS-UNG) hè un ottenutu da espressione recombinante in E. coli.L'enzima catalizza a liberazione di uracile liberu da u DNA monocatena è doppia catena chì cuntene uracile è hè inattivu contr'à l'RNA.In cunfrontu cù l'enzima UNG cunvinziunali di l'origine di u genu E. coli, l'enzima TS-UNG hà una attività più alta à basse temperature (20 ℃ ~ 37 ℃) è hè sensibile à a temperatura è facilmente inattivata (50 ℃), evitendu a degradazione di l'amplificazione chì cuntene dUTP. i prudutti à a temperatura di l'ambienti da l'attività residuale chì ponu esse dopu l'inattivazione di l'enzima UNG cunvinziunali.Per quessa, l'enzima TS-UNG ùn hè micca solu adattatu per a reazione di prevenzione di a contaminazione di PCR, ma ancu currisponde bè cù u prugramma di amplificazione RT-PCR è pò esse aduprata in a reazione di prevenzione di contaminazione RT-PCR.

Applicazione cunsigliata

Amplificazione di a prevenzione di a contaminazione

Cundizione di almacenamiento

-20 ° C per u almacenamentu à longu andà, deve esse mischju bè prima di l'usu, evitendu friquenti-discongeli.

Buffer di almacenamentu

20 mM Tris-HCl (pH 7,5), 100 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, Stabilizer, 50% Glicerol.

Definizione di unità

La quantità di enzima necessaria per degradare 1 µg di DNA a filamento singolo contenente basi dU in 1 ora a 37 °C è 1 unità di attività (U).

Controlu di qualità

1.Purezza elettroforetica SDS-PAGE superiore a 98%

2.Attività di degradazione, cuntrollu di batch-to-batch, stabilità

3.Nisuna attività di nucleasi esogena, nè contaminazione di endonucleasi esogene o esonucleasi.

Istruzzioni

Nota: a: Se usata per qPCR/qRT-PCR, a sonda fluorescente deve esse aghjuntu à u sistema di reazione.Di solitu, una cuncentrazione di primer finali di 0,2 μM pò dà boni risultati;quandu u funziunamentu di reazzione hè poviru, a cuncintrazione di primer pò esse aghjustatu in a gamma di 0,2-1 μM.Di solitu, a cuncentrazione di a sonda hè ottimisata in a gamma di 0,1-0,3 μM.Esperimenti di gradiente di cuncentrazione ponu esse realizati per truvà a megliu cumminazione di primer è sonda.

Notes

1.A temperatura di reazione ottima di l'enzima TS-UNG hè relativamente bassu, è pò esse ottimizzata in a gamma di 20 ℃ ~ 37 ℃, a dosa di l'enzima è u tempu di reazione pò esse ottimizzata in a gamma di 0,1 ~ 0,5 U, 5 ~ 10 minuti;è l'enzima pò esse inattivata in u prucessu di trascrizzione inversa.

2.Hè adattatu per PCR è RT-PCR per prevene a contaminazione.

3.Evite friquenti-discongeli, è ùn espone micca à grandi fluttuazioni di temperatura.

4.Diversi geni per esse amplificati anu una diversa efficienza d'utilizazione di dUTP è sensibilità à l'enzima UNG, per quessa, se l'usu di u sistema UNG porta à una diminuzione di a sensibilità di rilevazione, u sistema di reazione deve esse aghjustatu è ottimizzatu, se avete bisognu di supportu tecnicu, per piacè cuntattate. a nostra cumpagnia.