2×PCR Master Mix (senza colorante)
PCR Master Mix hè un tipu di soluzione PCR premixed convenzionale chì hè pronta per l'usu, cumprese Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 è buffer ottimizzatu.Duranti a reazzione, solu u primu è u mudellu pò esse aghjuntu per l'amplificazione, chì simplificà assai l'operazione di l'esperimentu.Stu pruduttu cuntene stabilizzatori eccellenti è pò esse guardatu per 3 mesi à 4 ℃.U pruduttu PCR hà una protrusione 3′-dA è pò esse facilmente clonatu in u vettore T.
Cundizioni di almacenamiento
U pruduttu deve esse guardatu à -25 ℃ ~ -15 ℃ per dui anni.
Specificazioni
| Fidelity (vs.Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Overhang | 3′-A |
| Polimerasi | Taq DNA polimerasi |
| Format di reazione | SuperMix o Master Mix |
| Velocità di reazione | Standard |
| Tipu di pruduttu | PCR Master Mix (2×) |
Istruzzioni
1.Sistema di reazione
| Cumpunenti | Taille (μL) |
| Template DNA | Adatta |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | À 50 |
2.Protocolu di amplificazione
| Passi di ciclu | Température (°C) | U tempu | Cicli |
| Pre-denaturazione | 94 ℃ | 5 minuti | 1 |
| Denaturazione | 94 ℃ | 30 sec | 35 |
| Ricottura | 50-60 ℃ | 30 sec | |
| Estensione | 72 ℃ | 30-60 sec/kb | |
| Extension finale | 72 ℃ | 10 minuti | 1 |
Note:
1) Utilizazione di mudelli: 50-200 ng DNA genomicu;0,1-10 ng di DNA plasmidico.
2) Mg2+cuncentrazione: Stu pruduttu cuntene 3 mM di MgCl2 adattatu per a maiò parte di e reazzioni PCR.
3) Temperature de recuit : si référez-vous à la valeur de Tm teorique des Primers.A temperatura d'annealing pò esse stabilita à 2-5 ℃ più bassu di u valore teoricu di l'amori.
4) Tempu di estensione: Per l'identificazione moleculare, 30 sec/kb hè cunsigliatu.Per a clonazione di geni, 60sec/kb hè cunsigliatu.
Notes
1.Per a vostra sicurezza è salute, per piacè purtassi camice di laboratoriu è guanti dispunibuli per u funziunamentu.
2.Per usu di ricerca solu!
