Kit di estrazione di DNA/RNA virale
Stu kit hè adattatu per l'estrazione rapida di DNA / RNA virali di alta purezza da campioni cum'è tamponi nasofaringei, tamponi ambientali, supernatanti di cultura cellulare è supernatanti di omogenati tissutali.U kit hè basatu annantu à a tecnulugia di purificazione di a membrana di silice chì elimina a necessità d'utilizà solventi organici di fenol / cloroformu o precipitazione di l'alcohol chì richiede tempu per estrae DNA / RNA virali di alta qualità.L'acidi nucleici ottenuti sò liberi di impurità è pronti per l'usu in esperimenti downstream cum'è trascrizione inversa, PCR, RT-PCR, PCR in tempu reale, sequenza di a prossima generazione (NGS) è Northern blot.
Cundizioni di almacenamiento
Mantene à 15 ~ 25 ℃, è trasporta à a temperatura di l'ambienti
Cumpunenti
| Cumpunenti | 100RXNS |
| tampon VL | 50 ml |
| Buffer RW | 120 ml |
| ddH2 O sans RNase | 6 ml |
| Colonne FastPure RNA | 100 |
| Tubi di raccolta (2 ml) | 100 |
| Tubi di raccolta senza RNasi (1,5 ml) | 100 |
Buffer VL:Fornite un ambiente per a lisi è u ligame.
Buffer RW:Eliminate i proteini residuali è altre impurità.
DdH2O senza RNasi:Elute DNA/RNA da a membrana in a colonna di spin.
Colonne FastPure RNA:In particulare adsorbe DNA / RNA.
Tubi di raccolta 2 ml:Coglie u filtratu.
Tubi di raccolta senza RNasi da 1,5 ml:Raccoglie DNA/RNA.
Applicazioni
Tamponi nasofaringei, tamponi ambientali, supernatanti di cultura cellulare e supernatanti di omogenati tissutali.
Mater auto-preparatuiali
Puntali per pipette senza RNasi, tubi da centrifuga da 1,5 ml senza RNasi, centrifuga, miscelatore vortice e pipette.
Prucessu di esperimentu
Eseguite tutti i seguenti passi in un armariu di biosicurezza.
1. Aghjunghjite 200 μl di u campione à un tubu di centrifugazione senza RNasi (cumpone cù PBS o 0,9% NaCl in casu di mostra insufficiente), aghjunghje 500 μl di Buffer VL, mischjà bè cù vortexing per 15 - 30 sec, è centrifuga. brevi per cullà u mischju à u fondu di u tubu.
2. Place FastPure RNA Columns in a Collection Tubes 2 ml.Trasferisce a mistura da u Passu 1 à FastPure RNA Columns, centrifuga à 12,000 rpm (13,400 × g) per 1 min, è scartate u filtratu.
3. Aghjunghjite 600 μl di Buffer RW à FastPure RNA Columns, centrifugate à 12.000 rpm (13.400 × g) per 30 sec, è scartate u filtratu.
4. Repetite Step 3.
5. Centrifuge a colonna viota à 12 000 rpm (13 400 × g) per 2 min.
6. Trasferisce cù cura FastPure RNA Columns in una nova RNase-free Collection Tubes 1,5 ml (furnita in u kit), è aghjunghje 30 - 50 μl di RNase-free ddH2O à u centru di a membrana senza toccu a colonna.Lasciate stà à a temperatura di l'ambienti per 1 min è centrifuga à 12.000 rpm (13.400 × g) per 1 min.
7. Scartate FastPure RNA Columns.L'ADN / RNA pò esse usatu direttamente per analisi successive, o almacenatu à -30 ~ -15 ° C per un cortu periodu o -85 ~ -65 ° C per un periudu più longu.
Notes
Solu per usu di ricerca.Ùn hè micca usatu in i prucessi di diagnostichi.
1. Equilibrate samples à a temperatura di l'ambienti in anticipu.
2. I virus sò assai infittivi.Per piacè assicuratevi di piglià tutte e precauzioni di sicurezza necessarie prima di l'esperimentu.
3. Evite a congelazione ripetuta è u scongelu di l'esemplariu, perchè questu pò purtà à a degradazione o u rendiment ridutta di l'ADN / RNA virali estratti.
4. L'equipaggiu autopreparatu include punte di pipette senza RNasi, tubi da centrifuga senza RNase da 1,5 ml, centrifuga, mixer vortex e pipette.
5. Quandu aduprate u kit, portate un mantellu di labburatoriu, guanti di lattice dispunibuli è una mascara dispunibile è utilizate consumabili senza RNase per minimizzà u risicu di contaminazione da RNase.
6. Eseguite tutti i passi à a temperatura di l'ambienti, salvu s'ellu ùn hè micca specificatu.
Meccanismu è flussu di travagliu
