2 × PCR Super Mix (cù Tintura)
2× PCR Master Mix cuntene Taq DNA Polymerase, dNTPs, è altri cumpunenti PCR necessarii.U Master Mix hè stabile per 3 mesi à 4 ℃ cù i nostri stabilizatori persunalizati.A soluzione di pre-mix hè ottimizzata per a PCR convenzionale è pronta per l'usu aghjustendu un mudellu di DNA è primers.I prudutti di PCR ponu esse caricati direttamente per l'elettroforesi cù colorante blu di bromofenol precaricatu.I prudutti amplificati cuntenenu 3 '-dA protrusione è ponu esse facilmente clonati in u vettore T.U 2×PCR Master Mix simplifica a prucedura di PCR è riduce a contaminazione.
Cundizioni di almacenamiento
I prudutti deve esse guardatu à -25 ℃ ~ -15 ℃ per 2 anni.
Specificazioni
| Fidelity (vs.Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Overhang | 3 '-A |
| Polimerasi | Taq DNA polimerasi |
| Format di reazione | SuperMix o Master Mix |
| Velocità di reazione | Standard |
| Tipu di pruduttu | PCR Master Mix (2x) |
Istruzzioni
1.Sistema di reazione
| Cumpunenti | Volume(μl) |
| Template DNA | Adatta |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| 2 × PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | à 50 |
2.Protocolu di amplificazione
| Passi di ciclu | Température (°C) | U tempu | Cicli |
| Denaturazione iniziale | 94 | 5 min | 1 |
| Denaturazione | 94 | 30 sec | 35 |
| Ricottura | 50-60 | 30 sec | |
| Estensione | 72 | 30-60 sec/kb | |
| L'estensione finale | 72 | 10 min | 1 |
Nota:
1) Utilizazione di mudelli: 50-200ng DNA genomicu;0,1-10 ng di DNA plasmidico.
2) Mg2+cuncentrazione: Stu pruduttu cuntene 3mM di MgCl2, adattatu per a maiò parte di e reazzioni PCR.
3) Température de recuit : si référer à la valeur de Tm teorique des primers.A temperatura d'annealing pò esse stabilita à 2-5 ℃ più bassu di u valore teoricu di u primer.
4) Tempu di estensione: Per l'identificazione moleculare, 30 sec/kb hè cunsigliatu.Per a clonazione di geni, 60 sec/kb hè cunsigliatu.
Notes
1.I prudutti di PCR cù 2 × PCR Master Mix ùn sò micca adattati per l'elettroforesi in gel di poliacrilamida.
2.Per a vostra sicurezza è salute, per piacè purtassi camice di laboratoriu è guanti dispunibuli per u funziunamentu.
3.Hè aduprata solu per l'usu di ricerca!
